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|a Kranen, Eva.
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|a Autodisplay komplexer Enzyme für biokatalytische Anwendungen.
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|a Göttingen :
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|a Print version record.
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|a 1 Zusammenfassung; 2 Summary; 3 Einleitung; 3.1 Biokatalyse; 3.1.1 Oxidoreduktasen in der Biokatalyse; 3.1.1.1 Möglichkeiten zur Regenerierung von Pyridinnukleotid-Cofaktoren; 3.1.2 NADH-Oxidasen; 3.1.2.1 Die NADH-Oxidase NOx aus Lactobacillus brevis; 3.1.3 Transferasen in der Biokatalyse; 3.1.4 Prenyltransferasen; 3.1.4.1 Die Prenyltransferase FgaPT2 aus Aspergillus fumigatus; 3.1.5 Ganzzellbiokatalysatoren; 3.1.5.1 Autodisplay von Enzymen zur Entwicklung von Ganzzellbiokatalysatoren; 3.1.6 Ziele der Arbeit; 4 Materialien ; 4.1 Materialien; 4.1.1 Geräte; 4.1.2 Chemikalien und Materialien.
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|a 4.1.3 Reagenziensätze ("kits")4.1.4 Antikörper; 4.1.5 Enzyme; 4.1.6 Oligonukleotide; 4.1.7 Bakterienstämme; 4.1.8 Plasmide; 4.2 Nährmedien, Puffer und Lösungen; 4.2.1 Nährmedien; 4.2.2 Puffer und Lösungen; 5 Methoden ; 5.1 Arbeiten mit Bakterien; 5.1.1 Kultivierung; 5.1.2 Stammhaltung; 5.1.3 Bestimmung der optischen Dichte; 5.1.4 Induktion der Proteinexpression; 5.1.5 Herstellung elektrokompetenter Stämme; 5.1.6 Transformation durch Elektroporation; 5.1.7 Lyophilisieren von Zellproben; 5.2 Arbeiten mit Nukleinsäuren; 5.2.1 Plasmidisolierung ; 5.2.2 Polymerasekettenreaktion; 5.2.3 Ligation
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|a 5.2.4 Entsalzen von DNALösungen mittels Dialyse5.2.5 Enzymatische Spaltung von DNAFragmenten; 5.2.6 Agarosegelelektrophorese; 5.2.7 Extraktion von DNAFragmenten aus Agarosegel; 5.2.8 DNASequenzanalyse; 5.3 Arbeiten mit Proteinen; 5.3.1 Isolierung von Proteinen der äußeren Bakterienmembran; 5.3.2 Proteasezugänglichkeit oberflächenexprimierter Proteine; 5.3.3 NatriumdodecylsulfatPolyacrylamidgelelektrophorese (SDSPAGE); 5.3.4 Western Blotting; 5.3.5 Immunfärbung; 5.4 Arbeiten mit Ganzzellbiokatalysatoren; 5.4.1 Vorbereitung von Zellen für NADH-Oxidase-Aktivitätsbestimmungen.
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|a 5.4.2 Photometrische NADH-Oxidase-Aktivitätsbestimmung 5.4.3 Photometrischer NADH-Oxidase-Aktivitätstest im Mikrotiterplattenmaßstab; 5.4.4 Berechnung der Aktivität nach dem Lambert-Beerschen Gesetz; 5.4.5 Lagerungsfähigkeit von NOxGanzzellbiokatalysatoren; 5.4.6 Wiederverwendbarkeit von NOxGanzzellbiokatalysatoren; 5.4.7 Einsatz von NOxGanzzellbiokatalysatoren zur Cofaktorregenerierung ; 5.4.8 Vorbereitung von Zellen für FgaPT2Aktivitätsbestimmungen; 5.4.9 HPLCgestützter FgaPT2Aktivitätstest; 5.4.10 Untersuchung von Reaktionsprodukten mittels LCMS.
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|a 5.4.11 Lagerungsfähigkeit von FgaPT2Ganzzellbiokatalysatoren5.4.12 Wiederverwendbarkeit von FgaPT2Ganzzellbiokatalysatoren; 6 Experimente und Ergebnisse ; 6.1 Autodisplay der NADH-Oxidase aus Lactobacillus brevis; 6.1.1 Genkonstruktion; 6.1.2 Expression und Oberflächenständigkeit der NOx; 6.1.3 Aktivitätsbestimmung des NOx-Ganzzellbiokatalysators; 6.1.3.1 Optischer Test nach Otto Warburg; 6.1.3.2 NADH-Oxidase-Aktivität NOx-präsentierender, lyophilisierter Zellen; 6.1.3.3 NADH-Oxidase-Aktivität NOx-präsentierender "resting cells"
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|a 6.1.3.4 NADH-Oxidase-Aktivität von NOx-präsentierenden E. coli UT5600(DE3).
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|x Biotechnology.
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|a Kranen, Eva.
|t Autodisplay komplexer Enzyme für biokatalytische Anwendungen.
|d Göttingen : Cuvillier Verlag, ©2011
|z 9783869556956
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|y Click for online access
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